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关于重组DNA用于提高顶头孢霉对头孢菌素C的生产

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发表于 4 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
重组DNA修饰的丝状真菌顶头孢霉菌株LU4-79-6比非重组菌株394-4产生更多的抗生素头孢菌素C,该菌株通过转化而得。通过多轮诱变并筛选改善的抗生素生物合成作用而从顶头孢霉 ATCC 11550 衍生的菌株394-4 已用于工业规模生产头孢菌素C。


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LU4-79-6菌株在其高分子量DNA中有一个pPS56 DNA插入片段。质粒pPS56包括显性潮霉素B抗性标记和一个含有cef EF基因的7 kb Bam H1 顶头孢霉 DNA片段。
CEFEF基因编码一种双功能蛋白,该蛋白具有两个顺序起作用的头孢菌素生物合成酶活性:脱乙酰氧基头孢菌素C合成酶(DAOCS)和
脱乙酰头孢菌素C合成酶(DACS)。LU4-79-6菌株的提取物比其非重组亲本的相应提取物具有 2倍的DAOCS活性。LU4-79-6菌株比394-4菌株分泌的青霉素N(DAOCS的底物)少。在无潮霉素B的培养基中生长后,保留了对潮霉素B的抗性,pPS56 DNA的存在,细胞内DAOCS升高,
青霉素N产量减少和头孢菌素C产量增加。重组菌株的优越性已在中试规模上得到证实。





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