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基于低分子量,支链聚乙烯亚胺的新型DNA传递非病毒载体:分子量对转染效率和细胞毒...

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发表于 2019-12-23 10:16:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
目的:合成了低分子量支链聚乙烯亚胺(LMW-PEI),并研究了其作为用于基因递送的DNA载体的理化性质,细胞毒性和转染效率。

方法:通过酸催化氮丙啶的开环聚合反应合成的LMW-PEI的体系结构通过尺寸排阻色谱结合激光散射和 13 C-NMR光谱进行了表征。通过LDH和MTT分析定量体外细胞毒性作用,并通过透射电子显微镜可视化。使用由SV40启动子驱动的萤光素酶作为报告基因系统,在ECV304细胞中监测转基因表达的潜力。
QQ截图20191223101329.png
结果:具有低分支度的LMW-PEI(Mw 11'900 D)被合成为用于基因递送的DNA载体。与高分子量聚乙烯亚胺(HMW-PEI; Mw l'616'OOO D),此处所述的聚合物显示出不同的支化度,并且在宽范围的浓度下细胞毒性较小。如通过透射电子显微镜所证明的,LMW-PEI仅形成小的聚集体,其在存在血清的情况下被不同细胞有效地吸收,最可能是通过内吞途径。通过报道基因荧光素酶的表达测量,LMW-PEI产生的转染效率比HMW-PEI获得的转染效率高两个数量级。报道基因的表达是浓度依赖性的,但是与脂转染相反,其与血清添加无关。

结论:此处描述的LMW-PEI是一种新型,高效且无细胞毒性的载体,对于基因治疗应用具有良好的效率/毒性特征。


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